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发表于 2009-2-12 17:57:18
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[h1]新疆新生儿轮状病毒无症状感染的调查[/h1]
杨学磊 蔡 霞 A组轮状病毒(RV)是引起婴幼儿病毒性肠炎的主要病原并可造成流行,但新生儿感染常年发生且大多无症状[1-3]。为了解新疆新生儿轮状病毒感染情况,本研究收集婴儿室健康新生儿粪便标本131例,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法和电镜法检测轮状病毒,并对有关问题进行了探讨。
一、材料和方法
1.标本采集:1992年3月~5月收集出生1~13日龄无腹泻健康新生儿粪样,自新疆自治区人民医院爱婴病房收集66例,新疆医学院第一附属医院爱婴病房收集65例,共131例,其中维吾尔族(简称维族)新生儿35例。每个新生儿采集一次。粪便为墨绿色(胎粪)或黄色稠糊状或成形便。标本经消洁小瓶收集置-20℃贮存备用。
2.方法:(1)核酸电泳(PAGE):用酚-氯仿提取法提取轮状病毒核酸,采用垂直板式电泳槽连续电泳分离。凝胶板规格20 cm×14 cm×0.1 cm,凝胶浓度为5%,30 mA恒流,室温泳动3~4小时。银染显色,5%醋酸固定,观察摄片,制干保存。(2)电镜观察:直接电镜法按常规进行。
二、结果:
1.电泳检测:131例新生儿粪样,PAGE阳性40例,阳性率为30.5%(40/131)。电泳图型皆为相同的典型A组轮状病毒长型图谱。说明在此观察期内,本地新生儿的轮状病毒感染是由同一种电泳图型的毒株传播所致。在所采集的粪样中,维族新生儿35例,阳性16例(45.7%);与汉族新生儿96例,阳性24例(25%)比较,二者差异有显著意义(χ2=5.19,P<0.05)。
2.电镜观察:选4例PAGE阳性粪样进行电镜检查,可见明显聚集,个别破碎,多为单衣壳的轮状病毒颗粒。
三、讨论:
RV是婴幼儿和多种新生幼龄动物急性胃肠炎的主要病原之一。它是由11个基因片段组成的双链RNA病毒。迄今,各国研究者已从人和动物感染中分离到多种RV,根据这些RV组特异性抗原和核酸电泳图型的不同,将RV分为A、B、C、D、E、F、G七组,其主要感染人类的是A、B、C三组,而在人类广泛流行具有很强致病作用的主要是A组[1,4]。目前根据RV结构蛋白VP7和VP4抗原性的差异,将A组RV分为G和P两种血清型系统,G血清型至少存在14个型,其中主要感染人类的G1-G4型均可引起新生儿无症状感染;P血清型至少存在18个型,仅其2型引起新生儿无症状感染[5]。
据文献报道,新生儿轮状病毒感染率为30%~65%不等且大多数为无症状感染[1-3]。本研究证实新疆新生儿有轮状病毒无症状感染的存在,感染率为30.5%。其维汉感染的悬殊是否与其生活习惯有关,有待进一步探讨。
新生儿轮状病毒的检测,PAGE方法因其简便,结果准确可靠,无假阳性,而被广泛应用。根据PAGE法所见的电泳图型,检出的40例阳性标本为同一种长型图型。已知具有相同电泳图型的轮状病毒可以属于不同的血清型别,而感染人类的几种主要血清型均可感染新生儿,因此,40例阳性标本的血清型是否相同,维汉有无异同,尚待进一步研究。
一些学者认为,新生儿轮状病毒的弱毒性是引起新生儿无症状感染的重要原因,其他因素如新生儿缺乏轮状病毒受体,获得了母源血清抗体,或接受了母乳中的轮状病毒抗体等在新生儿期仅起到无症状感染的保护作用。另有报道,未曾哺过母乳的新生儿同样表现为无症状感染,提示母乳中的轮状病毒抗体在新生儿无症状感染中可能不具有重要作用[3]。究竟为何新生儿感染轮状病毒大多无症状,尚待定论。本研究结果与文献报道[2]一致:新生儿易感的轮状病毒弱毒株,遗传性状甚稳定,在婴儿室内长期传播而未发生基因组的变异,可能是个理想的候选疫苗株。可见,对新生儿轮状病毒无症状感染的进一步研究可能具有深远的意义。作者单位:830001 乌鲁木齐新疆维吾尔自治区儿科研究所(杨学磊)
新疆医科大学第一附属医院妇产科(蔡霞)参考文献
1 Dunn SJ,Greenberg HB, Ward RL,et al.Serotypic and genotypic characterization of human serotype 10 rotaviruses from asymptomatic neonates.J Clin Microbiol,1993,31:165-169.
2 白植生,吴妙灵,宋小冬,等.新生儿轮状病毒无症状感染的研究.中华微生物和免疫学杂志,1990,10:57-61.
3 傅万海,彭宣君,卓礼梅,等.聚合酶链反应诊断新生儿轮状病毒无症状感染的研究.中华微生物和免疫学杂志,1994,14:54-56.
4 Sair L J.Viral diarrheal of man and animals. Boca Raton, Florida: CRC Press.1990,73-95.
5 袁丽娟,钱渊,刘军,等.北京等我国四个地区婴幼儿腹泻轮状病毒VP4和VP7型别的研究.病毒学报,1994,10:136-144.http://www.hmphanmi.com.cn:8000/periodical/periodical.articles/zhwcyxzz/zhwc99/zhwc9903/990321.htm
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