|
发表于 2015-9-28 15:10:24
|
显示全部楼层
附 录 B (规范性附录) 采样及相关指标检测方法 B.1 物体表面、工作人员手的采样及微生物检测 B.1.1 采样与检测原则 B.1.1.1 对衣物等清洁织物样品的采集应在洗涤(消毒)后4 h内进行,如不能在4 h内送检的样品,应保存于0℃~4℃环境下,在24 h内完成检测。 B.1.1.2 对工作人员手样品的采集应在清洗(消毒)后、从事工作前进行,如不能在4 h内送检的样品,应保存于0℃~4℃环境下,在24 h内完成检测。 B.1.2 采样方法 B.1.2.1 衣物等清洁织物表面的采样:随机抽取洗涤(消毒)后的衣物等,将衣物内侧面对折并使内侧 面和外侧面同时暴露,用5 cm×5 cm灭菌规格板放在其两面暴露部位的中央或上下两部各25 cm2 的面积范围内,用1个浸湿无菌采样液(0.03 mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水)的棉拭子在规格板内横竖往返各涂擦5次,涂擦过程中同时转动棉拭子,用灭菌剪刀剪去或折断棉签手接触的部分,将棉拭子放入10 mL采样液管内送检。 B.1.2.2 工作台面、地面等其他物体表面的采样:将25cm2 (5cm×5cm)的无菌规格板随机放在被检物体表面,用1个浸湿采样液的棉拭子在规格板内横竖往返各涂擦5次,涂擦过程中同时转动棉拭子,连续采样4 个规格板面积(各采样点不应重复采取),共采集 100 cm2,若被采样表面积<100 cm2可采集50 cm2 ,用灭菌剪刀剪去或折断棉签手接触的部分,将棉拭子放入10 mL采样液管内送检。 B.1.2.3 手的采样:被检人双手五指并拢,用1个浸湿采样液的棉拭子在双手指曲面,从指根到指端来回 涂擦2次,一只成人手涂擦面积约为30 cm2 ,涂擦过程中同时转动棉拭子,用灭菌剪刀剪去或折断棉签手接触的部分,将棉拭子放入10 mL采样液管内送检。若采样手表面有消毒剂残留时,采样液应含相应中和剂。 B.1.3 微生物指标检测方法 B.1.3.1 菌落总数 B.1.3.1.1 检测方法:参照GB 15982执行。 B.1.3.1.2 检测步骤:将每支采样管振打80次,取1 mL样液接种无菌平皿内,如污染严重,可做适当稀释后接种,取0.5 mL样液注入含有4.5 mL无菌生理盐水的试管中,另换一支1 mL无菌吸管反复吹吸,取1 mL样液接种无菌平皿内。如此类推。采样液和样品稀释液各加入2个无菌平皿作空白对照。每个样本平行接种2个无菌平皿,及时将15 mL~20 mL冷却至46℃的营养琼脂倾注入平皿,摇匀并冷却后置36℃±1℃培养48 h,计数平板上菌落数,并记录相应稀释倍数。以菌落形成单位(CFU)表示。 B.1.3.1.3 结果与报告:计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数为所得检测结果。若所有稀释度平板均无菌落生长时,则以平板上菌落数平均值为0进行计算。衣物等清洁织物和其他物体 表面及手表面菌落总数以每平方厘米的菌落总数(CFU/cm2 )报告。 衣物等清洁织物和其他物体表面及手表面菌落总数计算方法见式(B.1):
|
|