关于物表及手培养的稀释倍数的疑惑（4楼有详尽回复）

dearhang

本帖最后由 茶韵幽香 于 2013-1-26 10:46 编辑

物表和手培养中的稀释倍数，怎么算法？标准上说的从10ml采样洗脱液中取1ml打入平板中，可不可以理解为10倍。如果从5ml采样液中取0.5ml液打入平板中也是10倍稀释？对吗?以此推算5ml取50ul就是100倍的稀释。请求高人指点。




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茶韵幽香
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无尽的沙

希望有哪位老师给个解答，谢谢!

大约在冬季

“10ml采样洗脱液中取1ml”l和“5ml采样液中取0.5ml液”打入平板中是10倍稀释，即平板上出现细菌数X10倍=细菌总数。环境卫生学、消毒效果采样监测规范要求使用10ml采样液。

亦青

本帖最后由 亦青 于 2013-5-23 14:49 编辑

             是的，规范采样的方法上写得很明确，将采样后的棉拭子投入10ML含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，然后无菌试管吸取稀释后的洗脱液1.0ml接种平皿，这样就是稀释了10倍。如果将采样后的棉拭子投入5ML含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，然后吸取稀释后的洗脱液1.0ml接种平皿，这样就是稀释了5倍。       象你所说的，如果将采样后的棉拭子投入5ML含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，然后吸取稀释后洗脱液0.5ml接种平皿，也是稀释了10倍。由于1ml =1000ul，换算出，从5ml吸取50ul就是稀释100倍，理论上是这样的。      但是，如果吸取稀释后的洗脱液太少，根本不可能根本无法均匀地接种于营养琼脂培养基平皿，培养出的结果也不具有代表性。应象规范所要求的，吸取稀释后洗脱液1ML接种平皿。

无尽的沙

谢谢两位老师的指点，实际工作中检测工作量大，我们不可能采用倾注法做物表和手培养，只能吸出1ML打入平板中。由于1ML打入平板表面量太大，多以通常采用5ML洗脱液，取50UL打入平板表面，结果倍数乘以100.但这样不规范，结果误差大。所以目前5ML，取0.5ML打入平板中。这是现行的做法。心虚呀。不知道我这种做法，其他的单位有不有/






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亦青

本帖最后由 亦青 于 2013-1-25 17:52 编辑

无尽的沙 发表于 2013-1-25 10:15
                               
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谢谢两位老师的指点，实际工作中检测工作量大，我们不可能采用倾注法做物表和手培养，只能吸出1ML打入平板中 ...

      平时我们实验室是5ML，吸取1ML倾注法培养。遇污染程度严重的，加大稀释倍数。

茶韵幽香

无尽的沙 发表于 2013-1-25 10:15
                               
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谢谢两位老师的指点，实际工作中检测工作量大，我们不可能采用倾注法做物表和手培养，只能吸出1ML打入平板中 ...

院感标本常规处理要用倾注法来做，所以去1ML接种不算多，如果您用的是划线接种法，那么一般0.2ml接种，这样灵敏度会降低，所以建议还是用倾注法来做较好。

lucky12345

亦青 发表于 2013-1-24 21:46
                               
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是的，规范采样的方法上写得很明确，将采样后的棉拭子投入10ML含相应中和剂的无菌洗脱液的试管 ...

如果将采样后的棉拭子投入5ML含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，然后吸取稀释后的洗脱液1.0ml接种平皿，这样就是稀释了20倍。

老师，我怎么算不出事稀释20倍，我认为是稀释5倍。能告诉是怎么算出的吗？

亦青

本帖最后由 亦青 于 2013-5-23 14:53 编辑

lucky12345 发表于 2013-5-23 09:10
                               
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老师，我怎么算不出事稀释20倍，我认为是稀释5倍。能告诉是怎么算出的吗？

不好意思。是稀释了5倍。当时算的时候，反过来了，后来没注意算过。谢谢老师细心指正。